ドナー肝臓由来ナチュラルキラー（NK）細胞を用いた肝臓移植後の肝細胞癌再発に対する補助免疫療法
アピールポイント
- 通常は採取不可能な肝内在性NK細胞を用いた抗癌免疫細胞療法を開発した
- 肝内在性NK細胞は抗腫瘍分子TRAILを発現し、肝細胞癌に対する抗腫瘍活性が高い
- 本治療は有害事象が少なく、進行肝細胞癌の肝移植後再発を抑制する効果が期待できる
研究者のねらい
肝細胞癌は、2023年統計で5番目に多い癌である。肝硬変に合併する肝細胞癌に対する唯一の根治治療は肝臓移植であるが、再発率が10-20%であるにもかかわらず有効な術後補助療養や治療法がないのが現状である。肝臓内には、他の部位とは異なる特殊なリンパ球が存在している。特に、肝内在性ナチュラルキラー（NK）細胞は、腫瘍の増殖や感染症の拡大を防ぐ重要な役割をして担っており、TRAILと呼ばれる抗腫瘍分子を発現して、肝細胞癌を効率よく殺傷する。我々は、ヒトの肝臓内から採取した後サイトカイン刺激することによって強力な抗腫瘍活性を有する肝内在性NK細胞を用いた、肝臓移植後の肝細胞癌再発に対する補助免疫療法を開発した。
研究内容
TRAIL活性低下による肝腫瘍増殖、TRAIL陽性肝内在性NK細胞投与により腫瘍が縮小
B6マウスの門脈から肝臓を灌流したリンパ球中のNK細胞上に表出する抗腫瘍分子(TRAIL; TNF-related apoptosis inducing ligand)をフローサイトメトリーで解析した。70%肝切除後、3日目にはTRAIL発現が著明に低下した。
B6マウスの門脈内から肝癌腫瘍株(Hepa 1-6)を5×105個注入した1週間後の肝臓内腫瘍増殖を解析した。無処置マウスに対して、70%肝切除マウスは有意に、肝臓内腫瘍増殖が増加した(n=4)。
70%肝切除マウスに対して、門脈内から肝癌腫瘍株(Hepa 1-6)を5×105個注入した後に、活性化肝内在性NK細胞を5×105個尾静脈から投与すると、肝臓内腫瘍の増殖は抑制された。(Ohira M, Ohdan H, Transplantation 2006)
ヒト肝灌流液由来肝内在性NK細胞の肝細胞癌に対する抗腫瘍活性
NK細胞の割合は、肝臓内で46.4%、末梢血で21.9%。サイトカイン刺激でNK細胞上TRAILは肝臓内で65.8%、末梢血で29.6%であった。(n=7)
サイトカイン刺激後の肝内在性NK細胞の抗腫瘍活性は、有意に高い。
中分化型・低分化型肝癌はDeath receptor(DR4, DR5)は強発現、Decoy receptor(DcR1, DcR2)は発現なし。TRAIL感受性のある癌腫と言える。
ドナー肝由来NK細胞療法の臨床試験結果
肝移植時のドナーグラフト肝臓灌流液からリンパ球を抽出して、サイトカインで3-5日間刺激培養を行う。投与1日前に、抗CD3抗体を添加してT細胞除去を行い、肝臓移植後のレシピエントに経静脈的投与を行う治療法。
肝移植後3日目と7日の末梢血単核球の肝細胞癌に対する抗腫瘍活性。NK療法群で有意に増加している(n=7; NK, n=5; non-NK group)
NK療法を行ったレシピエントの末梢血NK細胞のキメラ率推移。ドナー由来のNK細胞は最長1ヶ月確認可能。
広島大学で24例の生体肝移植に対して第1相試験を実施。投与に関連する重篤な有害事象はなく安全性は確認された。肝細胞癌に対する生体肝移植後の無再発生存率は、背景をプロペンシティマッチで揃えた11例ずつで比較した場合、NK療法群が有意に良好であった。
今後の研究開発計画
治験第２相以降の臨床試験の計画実施、承認申請（日本、海外）、培養効率改善に向けた製造法の
スクリーニング・最適化、保存・輸送条件の最適化（事業化可能な条件設定）、細胞製品の製造・流通・販売、他の癌腫への応用
関連情報
代表的な特許：肝臓内NK細胞活性を増強する培養方法の開発（特願2025-130828）
代表的な論文：Ohira M, Ohdan H, et al. Cancer Immunol Immunother 2022
企業に望む事：臨床試験や承認申請に必要な製造・保存輸送技術の最適化を担い、細胞製品の事業化を推進してほしい。
研究者
大段 秀樹（Ohdan Hideki）
広島大学
大学院医系科学研究科（医）
教授
2025年BioJapan出展